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詳解探針法熒光定量PCR試劑盒檢測方法的局限性

更新時間:2023-02-24 點擊量:1022
  探針法熒光定量PCR試劑盒使用化學修飾的熱啟動聚合酶,反應(yīng)特異性高,大程度地避免了非特異擴增;反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,多個循環(huán)只需二十多分鐘;抗干擾的能力強,反應(yīng)重復性好,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復雜樣本中的靶基因進行檢測分析。
  探針法熒光定量PCR試劑盒安全使用注意:
  使用前請上下顛倒輕輕混勻,盡量避免起泡,并經(jīng)短暫離心后使用。
  所有操作嚴格按照說明書進行;
  反應(yīng)液應(yīng)避光保存;
  避免反復凍融,開啟后盡量在三個月內(nèi)使用完畢。
  試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化,混勻并短暫離心;
  反應(yīng)中盡量避免氣泡存在,管蓋需I蓋緊;
  使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服;
  樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進行,以免交叉污染。
  探針法熒光定量PCR試劑盒檢測方法的局限性:
  樣本檢測結(jié)果與樣本收集、處理、運送以及保存質(zhì)量有關(guān);
  陽性對照、擴增產(chǎn)物泄漏,會導致假陽性結(jié)果;
  病原體在流行過程中基因突變、重組,會導致假陰性結(jié)果;
  樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會出現(xiàn)假陽性結(jié)果;
  不同的提取方法存在提取效率差異,會導致假陰性結(jié)果;
  試劑運輸,保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準確的結(jié)果。